医疗健康
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染料法-PRECISE™ SYBR Green qPCR master mix
医疗健康 2021-12-10 11:45
SYBR Green I染料法qPCR预混液


产品信息
产品名称 货号 产品规格
PRECISE™ SYBR Green qPCR master mix (no rox) 202111YC01/05 1 ml/5ml
P PRECISE™ SYBR Green qPCR master mix (low rox) 202111LC01/05 1 ml/5ml
PRECISE™ SYBR Green qPCR master mix (high rox) 202111HC01/05 1 ml/5ml
PRECISE™ SYBR Green qPCR master mix  (premix rox) 202111MC01/05 1 ml/5ml
 
产品描述
PRECISE™ Master qPCR mix 是SYBR Green Ⅰ嵌合荧光法进行qPCR反应的2×专用预混液,具有高灵敏度和高特异性的特点。核心组分Taq DNA聚合酶经过升级改造、采用抗体法热启动,可以有效抑制样品准备过程中引物退火导致的非特异性扩增,具有检测灵敏度高、扩增产量高等诸多优点。同时配方添加了提升PCR 反应扩增效率因子和均衡不同GC 含量(30~70%)基因扩增的促进因子,使定量PCR 可以在宽广的定量区域内获得良好的线性关系。
 

产品优势
超高的扩增平台值:扩增产量大幅度提升,拥有超高扩增平台值。
灵敏度与特异性完美平衡:采用的Taq DNA Polymerase是经过升级改造的、基于抗体法修饰的新一代热启动聚合酶,配以针对 qPCR 优化的最适Buffer以及专利特异性促进因子,有效避免引物二聚体和非特异性扩增的产生。
兼容程度完美:提供ROX预混版本,适用于所有主流定量PCR仪。

实验案例
案例一 扩增puc 19质粒



案例二 扩增GAPDH
 
 
 
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反应体系
组分 体系(50μl) 体积(20μl) 终浓度
PRECISE™ SYBR Green qPCR master mix 25 10
Forward Primer (10 μM) 1 0.4 0.2 μM
Reverse Primer (10 μM) 1 0.4 0.2μM
ROX Reference Dye(50X)or Dye II(50X) 1 0.4
模板DNA X X -
无菌超纯水 To 50 μl To 20 -

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标准程序
循环步骤 温度 时间 循环数
预变性 95℃ 3 min 1
变性 95℃ 10 sec      
30 sec
40
退火延伸 55℃
溶解曲线阶段 仪器默认设置   1
快速程序
循环步骤 温度 时间 循环数
预变性 95℃ 30 sec 1
变性 95℃ 3 sec
20 sec
40
退火延伸 55℃
溶解曲线阶段 仪器默认设置   1
 
注意事项
1. 解冻后Master Mix 如果出现絮状或白色沉淀,手握缓慢溶解并上下轻柔颠倒混匀至溶液澄清,不影响试剂性能。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
3. 本产品仅作科研用途!
运输和保存方式
冰袋运输。-20℃避光储存,有效期18 个月。
本品避免反复冻融。产品中含有荧光染料SYBR Green I,保存或配制反应体系时需避免强光照射。


适用机型
◆ 使用ROX Reference Dye(50X)的PCR仪

 Applied Biosystems 7300 Real-Time PCR System(Thermo Fisher Scientific)
StepOnePlus Real-Time PCR System(Thermo Fisher Scientific)
◆  使用ROX Reference Dye II(50X)的PCR仪
 
Applied Biosystems7500/7500 Fast Real-Time PCR System(Thermo Fisher Scientific)
◆ 不需要使用ROX的PCR仪

Thermal Cycler Dice Real Time System III(Code No.TP950/TP970/TP980/TP990)
Thermal Cycler Dice Real Time System II(Code No.TP900/TP960)
Thermal Cycler Dice Real Time System Lite(Code No.TP700/TP760)
LightCycler 96/LightCycler 480 System(Roche Diagnostics)
CFX96 Real-Time PCR Detection System(Bio-Rad)
Smart Cycler System/Smart Cycler II System(Cepheid)